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培養(yǎng)基滅菌的方法

點(diǎn)擊次數(shù):12935   發(fā)布時(shí)間:2019/9/2 9:13:44

     培養(yǎng)基滅菌的方法
 
    什么是培養(yǎng)基滅菌?培養(yǎng)基滅菌的方法有哪些?今天上海古朵生物與您共享培養(yǎng)基滅菌的方法。
 
    一、熱滅菌的主要原理
 
    1.微生物的熱阻
 
    2.對(duì)數(shù)殘存定律
 
    3.理論滅菌時(shí)間的計(jì)算
 
    4.滅菌溫度的選擇
 
    二、滅菌方法
 
    1.高壓蒸汽滅菌:高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在愛(ài)制備過(guò)程中混入各種雜菌,分裝后應(yīng)立即滅菌,至少應(yīng)在24h內(nèi)完成滅菌工作。滅菌時(shí)一般是在0.105MPa壓力下,溫度121℃時(shí),滅菌15~30min即可。消毒時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),也不能超過(guò)規(guī)定的壓力范圍,否則有機(jī)物質(zhì)特別是維生素類(lèi)物質(zhì)就會(huì)在高溫下分解,失去營(yíng)養(yǎng)作用,也會(huì)使培養(yǎng)基變質(zhì)、變色,甚至難以凝固。將蒸餾水或自來(lái)水裝在三角瓶中,裝水量一般不超過(guò)瓶的2/3,用牛皮紙或硫酸紙包扎封口,然后放入高壓鍋中滅菌后即為無(wú)菌水。滅菌后的培養(yǎng)基可放到培養(yǎng)室中預(yù)培養(yǎng)3d,若無(wú)污染現(xiàn)象,則證明滅菌是徹底的,可以使用。暫時(shí)不用的培養(yǎng)基置于10℃下保存。含IAA或GA3的培養(yǎng)基應(yīng)在1周內(nèi)用完,其他培養(yǎng)基zui多也不要超過(guò)1個(gè)月。
 
    2.過(guò)濾滅菌:一些植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及有機(jī)物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇熱容易分解,不能與培養(yǎng)基一起進(jìn)行高溫滅菌,而要使用細(xì)菌過(guò)濾器濾去其中的雜菌。細(xì)菌過(guò)濾器與濾膜(孔徑0.45微米)使用之前要行高壓滅菌。過(guò)濾后的溶液要立即加入培養(yǎng)基中,若為液體培養(yǎng)基,可在培養(yǎng)基冷卻至30℃時(shí)加入;若為固體培養(yǎng)基,必須在培養(yǎng)基凝固之前(50-60℃)加入,振蕩使溶液與其他成分混合均勻。

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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